La guérison coquillière : un mécanisme de défense de la palourde japonaise Ruditapes philippinarum face au Vibrio tapetis dans le cadre de la maladie de l'anneau brun
Résumé
Since 1987, the Manila clam is prone to a recurrent infection: the Brown Ring Disease (BRD), caused by the bacterium Vibrio tapetis. This infection is characterized by the formation of a brown ring on the inner face of the valves and often provokes the death of the clam after the invasion of its circulatory system by the bacterium. However, some specimens can recover of this infection by mineralizing a new shell layer which covers the brown ring. The aim of this PhD study is to understand and to characterize how the Manila clams are able to resist to the BRD, principally in studying the mechanism of the shell repair. For this, some techniques like the Scanning Electron Microscopy (SEM), the confocale Raman micro-spectrometry, the WDS microprobe, as well as cellular staining, biochemical and the serology were used. The repair layer is composed by aragonite, polyenes, luminescent molecules on Raman spectra and sulphated molecules. The microstructure of the shell repair is often different than the non-BRD-affected inner layer one and shows a great variability. Furthermore, the shell organic matrix of the shell repair is quantitatively and qualitatively different than of the non-BRD-affected inner layer one and shows equally a great variability. Those non-BRD-affected versus repaired differences and those variabilities could be explained by a modification of the secretory regime of the of calcifying mantle cells, as well as a mobilisation of hemocytes beforehand charged in carbonate de calcium insoluble salts at the level of the shell repair zones.
Depuis 1987, la palourde japonaise est sujette à une infection récurrente : la Maladie de l'Anneau Brun (MAB), provoquée par la bactérie Vibrio tapetis. Cette infection est caractérisée par la formation d'un anneau brun sur la face interne des valves et provoque souvent la mort de la palourde, suite à l'invasion de son système circulatoire par la bactérie. Cependant, quelques spécimens peuvent guérir de cette infection en sécrétant une nouvelle couche minéralisée qui recouvre l'anneau brun. Le but du travail de cette thèse est de comprendre et caractériser comment les palourdes japonaises sont capables de résister à la MAB, principalement en étudiant le mécanisme de réparation coquillière. Pour ce faire, des techniques comme la Microscopie Electronique à Balayage (MEB), la micro-spectrométrie confocale Raman, la microsonde WDS (Wave-length Dispersive Spectrometry), ainsi que des colorations cellulaires, la biochimie et la sérologie ont été utilisées. La couche de réparation est composée d'aragonite, de polyènes, de molécules luminescentes au Raman et de molécules sulfatées. La microstructure de la couche de réparation est souvent différente de celle de la couche interne saine et montre une grande variabilité. De plus, la matrice organique coquillière de la couche de réparation est quantitativement et qualitativement différente de celle de la couche interne saine et montre également une grande variabilité. Ces différences saines-réparées et ces variabilités pourraient être expliquées par une modification du régime sécrétoire des cellules calcifiantes du manteau, ainsi que par une mobilisation d'hémocytes préalablement chargés en sels insolubles de carbonate de calcium au niveau des sites de réparation coquillière.